毕业论文
您现在的位置: 淀粉 >> 淀粉种类 >> 正文 >> 正文

糖原DPAS染色液淀粉酶消化法

来源:淀粉 时间:2023/12/14
福建白癜风医院 http://nb.ifeng.com/a/20200114/8061710_0.shtml

糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)

产品货号:R

产品规格:5×50ml/5×ml

产品简介:

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是唯一可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。

糖原D-PAS染色液的特点在于糖原PAS染色之前经淀粉酶处理,糖原消化时需要两张相同的切片,脱蜡后一张切片用含有淀粉酶的适当缓冲液处理,另一张仅用缓冲液处理。然后两张切片均用PAS法染色,消化后染色消失表明存在糖原。

产品组成:

自备材料:

1.蒸馏水

2.系列乙醇

操作步骤(仅供参考):

1.两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。

2.一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理,入水中1h作为对照。

3.流水冲洗两张切片各5~10min。

4.入过碘酸溶液,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。

5.自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。

6.入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染10~20min。

7.自来水冲洗10min。

8.入Mayer苏木素染色液,染细胞核1~2min。

9.(可选)酸性乙醇分化液分化2~5s。

10.自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗使其返蓝。

11.二甲苯透明,中性树胶封固。

染色结果:

注意事项:

1.切片脱蜡应尽量干冷,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。

2.过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃最佳。

3.试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。

4.酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。

5.在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。

6.况冶切片染色时间尽量要短。

有效期:6个月有效。

转载请注明:http://www.shenlongchuju.com/shgyz/8252.html

  • 上一篇文章:
  • 下一篇文章: 没有了