.基础培养基介绍
牛肉膏蛋白胨培养基适用于细菌培养。该培养基以牛肉膏为碳源,蛋白胨为氮源,加入适量的NaCl以提供适宜的渗透压,并用水稀释至mL,调节pH至7.~7.6,以满足细菌的生长需求。
高氏1号培养基专为放线菌培养设计。该培养基包含可溶性淀粉20g作为碳源,KNO31g提供氮源,同时加入适量的NaCl、K2HPO·3H2O、MgSO·7H2O以及FeSO·7H2O,以提供必要的矿物质和微量元素。在配制过程中,需注意可溶性淀粉需先用冷水调匀,再加入到其他成分中。
Martin培养基专为从土壤中分离真菌设计。该培养基包含K2HPO1g、MgSO·7H2O0.5g、蛋白胨5g以及葡萄糖10g,作为基础营养成分。同时,加入1/孟加拉红水溶液mL,以促进真菌的生长。在mL水中溶解上述成分,并自然调节pH值。然后,在℃下进行湿热灭菌30分钟,确保培养基的无菌状态。待培养基冷却至55~60℃时,再加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL),以抑制其他杂菌的生长。
马铃薯培养基(PDA)用于培养霉菌或酵母菌,其配制方法为:取去皮马铃薯克,加入蔗糖或葡萄糖20克,再加入水毫升。首先,将马铃薯切成约2厘米见方的小块,放入毫升的烧杯中,煮沸30分钟并不断搅拌以防糊底。接着,用双层纱布过滤煮沸后的马铃薯块,收集滤液并加入糖分,最后补足至毫升。此时培养基的自然pH值即适宜。对于霉菌的培养,宜使用蔗糖;而酵母菌的培养则选用葡萄糖。
察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)专为霉菌的培养而设计。其配制方法包括:蔗糖30克,硝酸钠2克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁(含7个结晶水)0.5克,氯化钾0.5克,硫酸亚铁(含7个结晶水)0.1克,以及毫升的水。需要调整pH值至7.0至7.2的范围内,以提供适宜的生长环境。
配制Hayflik培养基时需要:牛心消化液(或浸出液)毫升,蛋白胨10克,氯化钠5克,琼脂15克。将pH值调整至7.8至8.0的范围内,然后分装至每瓶70毫升。接着,在℃下进行湿热灭菌15分钟。待培养基冷却至约80℃时,再向每70毫升培养基中加入马血清20毫升、25%鲜酵母浸出液10毫升、15%醋酸铊水溶液2.5毫升,以及青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5毫升。最后,将混合物倾注到平板中。
.发酵及特殊培养基
麦氏(McCLary)培养基为酵母菌的生长培养提供了支持。配制麦氏培养基时,需要以下成分:葡萄糖0.1克,KCl0.18克,酵母膏0.25克,醋酸钠0.82克,琼脂1.5克,以及蒸馏水毫升。在℃下进行湿热灭菌,持续15分钟。
葡萄糖蛋白胨水培养基适用于不同试验,包括V.P.反应和甲基红试验。配制此培养基时,需准备以下成分:蛋白胨0.5克,葡萄糖0.5克,K2HPO0.2克,以及蒸馏水毫升。在分装后,用℃的湿热条件进行灭菌,持续20分钟。
蛋白胨水培养基专为吲哚试验设计并调节。其配方包括:蛋白胨10克,氯化钠5克,以及毫升蒸馏水。在分装后,以℃的湿热条件进行灭菌,持续20分钟。
糖发酵培养基用于细菌糖发酵试验的特殊配方:蛋白胨0.2克,氯化钠0.5克,磷酸二氢钾0.02克,蒸馏水毫升,以及1%水溶液的溴麝香草酚蓝0.3毫升和1克的糖类(如葡萄糖、蔗糖等)。配制时应先将蛋白胨和氯化钠溶于热水中,调整pH值至7.。最后,在灭菌过程中,需注意适当延长煮沸时间,以确保杜氏小管内无气泡残留。
为了培养厌氧菌,需要使用特制的RCM培养基。其配方包括:酵母膏3克,牛肉膏10克,蛋白胨10克,可溶性淀粉1克,葡萄糖5克,半胱氨酸盐酸盐0.5克,氯化钠3克,乙酸钠3克,以及毫升蒸馏水。在配制时,应将pH值调整至8.5,并加入刃天青3毫克/升作为指示剂。
TYA培养基专为厌氧菌培养使用,其配方如下:葡萄糖0克,牛肉膏2克,酵母膏2克,胰蛋白胨(bacto-typetone)6克,醋酸铵3克,KH2PO0.5克,MgSO·7H2O0.2克,FeSO·7H2O0.01克,加入毫升蒸馏水。在配制过程中,应将pH值调整至6.5。
玉米醪培养基用于厌氧菌的培养。首先,将65克玉米粉与毫升自来水混合均匀,然后煮沸10分钟,使其成为糊状。最后,将制备好的培养基置于℃的湿热环境中进行灭菌。
中性红培养基特别适合厌氧菌的生长,其配方包括:葡萄糖0克,胰蛋白胨6克,酵母膏2克,牛肉膏2克,醋酸铵3克,KH2PO5克,中性红0.2克,MgSO·7H2O0.2克,FeSO·7H2O0.01克,加入毫升自来水,混合均匀后煮沸。
这种培养基专为厌氧菌的培养打造,将毫升麦芽汁(6波美)与毫升水混合,加入10克CaCO3和10克明胶,调整pH至6.8,最后进行灭菌即可。
.用于微生物功能测定
?BCG牛乳培养基BCG牛乳培养基涉及乳酸发酵,需无菌操作。A液制备需将克脱脂乳粉与毫升水混合,然后在80℃下灭菌。同时,B液则需将10克酵母膏混入毫升水和20克琼脂中,调整pH值为6.8。
?乳酸菌培养基乳酸菌培养基含有牛肉膏,用于乳酸菌群的测试。其配方包括:5克牛肉膏、5克酵母膏、10克蛋白胨、10克葡萄糖以及5克NaCl,加入毫升水中,调节pH至6.8。
?酒精发酵培养基酒精发酵培养基专为酒精发酵设计,含10克蔗糖、0.5克MgSO·7H2O和0.5克NHNO3。
?柯索夫培养基柯索夫培养基专为钩端螺旋体的生长,其成分包括:0.克优质蛋白胨、0.7克NaCl以及0.02克KCl等。
0.多样用途培养基
?豆芽汁培养基豆芽汁培养基通过黄豆芽提供营养。首先,准备克黄豆芽,加入毫升水,煮沸一小时后过滤,并补足水分至原体积。
?LB培养基LB培养基是常用的细菌培养基,含有10克胰蛋白胨、10克氯化钠以及5克酵母提取物。
?复红亚硫酸钠培养基该培养基添加特异性成分用于检测。具体的步骤需要在溶解后加入10克乳糖,并调节pH值至7.2至7.。
?乳糖蛋白胨培养液乳糖蛋白胨培养液用于检测大肠菌群,其配方为:10克蛋白胨、5克牛肉膏、5克乳糖、5克氯化钠。
?伊红美蓝培养基伊红美蓝培养基用于检测大肠杆菌,含有蛋白胨10g、乳糖10g、K2HPO2g以及指示剂2%伊红Y和0.5%美蓝(亚甲蓝)。
通过上述不同类型的培养基,我们可以更好地理解和满足多种微生物的生长需求,从而推动微生物学研究的进一步发展。
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